Научный руководитель: к.б.н. Джансугурова Л.Б.
Цель проекта: Разработка способов специфического распознавания раковых клеток иммуноглоболиноподобными растительными лектинами и получение моноклональных антител к активированным в раковых клетках HER2/neu и EGFR.
Основные задания:
- Изучение характера взаимодействий между связывающими сиаловую кислоту лектинами пшеницы и членами семейства эпидермального фактора роста (HER2/neu и EGFR) в нормальных и раковых клетках.
- Изучение афинности лектинов, ассоциированных с клеточной поверхностью, с учетом обработки разными типами сиаловой кислоты. Молекулярное моделирование сиализированных гликанов, специфически распознающих активированные HER2/neu и EGFR.
- Разработка и получение сайт-специфически гликозилированных анти-HER2/neu и анти-EGFR моноклональных антител. Тестирование в системах in vitro и in vivo.
Ожидаемые результаты:
- В системах in vitro будет проведена качественная и количественная идентификация фосфорилированных и нефосфорилированных HER2/neu и EGFR в нормальных и раковых клетках.
- Будет проведена обработка различными типами сиаловой кислоты поверхностей нормальных и раковых клеток предстательной и молочной желез, изучен характер аффинности, получены сиаловые профили трансмембранных доменов HER2/neu и EGFR в нормальных и раковых клетках простаты и молочной железы, сделаны прижизненные имиджи поверхности клеток.
- В системах in vitro будет изучен характер взаимодействий между связывающими сиаловую кислоту лектинами пшеницы и членами семейства эпидермального фактора роста (HER2/neu и EGFR) в нормальных и раковых клетках. В режиме реального времени будут получены изображения комплексов рецептор-сиаловая кислота-лектин.
- Будет проведено молекулярное моделирование сиализированных гликанов, специфически распознающих активированные HER2/neu и EGFR: изучены кристаллические структуры комплексов между различными типами сиаловой кислоты и специфическими лектинами, моделированы вариации взаимодействия связывания по первичным и вторичным сайтам связывания с использованием различных ориентаций (цис-, транс- положения) кристаллических структур, проведена минимализация энергетических затрат и геометрическая оптимизация взаимодействия с учетом аминокислотных последовательностей в сайтах связывания рецепторов.
- Будет проведена иммунизация лабораторных животных (мышей) моделированными комплексами, наработаны антитела, выделены эпитопы. Полученные сайт-специфически гликозилированные анти-HER2/neu и анти-EGFR моноклональные антитела будут протестированы в системах in vitro и in vivo.
Источник финансирования: КН МОН РК
Объем финансирования: 2012г.- 9000,0 тыс.тг; 2013г. — 9 000,0 тыс.тг
